一代测序技术是利用DNA聚合酶，以待测单链DNA为模板，以脱氧核苷三磷酸(dNTP为底物)。 设立四种相互独立的测序反应体系。 在每个反应体系中加入不同的双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）作为链延伸终止剂。通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列。